تشخیص مولکولی سریع بیماری های ژنتیکی فابری و ذخیره سازی گلیکوژن 1A به وسیله روش آنالیز ذوب با وضوح بالا

قیمت: 43,000 تومان

دانلود رایگان مقاله

خرید ترجمه مقاله

عنوان فارسی

تشخیص مولکولی سریع بیماری های ژنتیکی فابری و ذخیره سازی گلیکوژن 1A به وسیله روش آنالیز ذوب با وضوح بالا

عنوان لاتین

Rapid Molecular Diagnosis of Genetic Diseases by High Resolution Melting Analysis: Fabry and Glycogen Storage 1A Diseases

آنالیز ذوب با وضوح بالا (HRMA) در مورد خطاهای متابولیسمی ذاتی روشی سریع، موثر، کارآمد و ارزان در غربالگری جهش های گوناگون و نادر می باشد. آنالیز ذوب با وضوح بالا (HRMA) روش مولکولی جدید برای ژنوتیپ چند ریختی تک نوکلئوتیدی بدون استفاده از پروب می باشد. ما در اینجا آنالیز ذوب با وضوح بالا (HRMA) را برای شناسایی جهش ژن های α-گالاکتوزیداز (GLA) و گلوگز-۶- فسفتاز- آلفا (G6PC) به ترتیب در بیماری های فابری (MIM 301500) و ذخیره گلیگوژن نوع 1A (GSD1A; MIM232200) را به کار بردیم. برای ارزیابی این روش DNA های ژنومی در مورد جهش های GLA شناخته شده,c.658C>T) (c.679C>T, c.772G>A, c.796G>A, c.718 - 719delAدر سه مرد آسیب دیده و دو فرد هتروزیگوت مشکوک با بیماری فابری، یک جهش G6PC (c.247C>T) در یک بیمار همودی برای این آسیب و ۱۰ نفر انسان سالم اهل ترکیه مورد بررسی قرار گرفت. HRMA به راحتی توانست آمپلیکون های جهش یافته را شناسایی نماید و آنها را از تمام آمپلیکون های GLA یا G6PC طبیعی تمیز دهد. HRMA نشان داد که روشی حساس، علمی، مقرون به صرفه برای غربالگری جهش برای تشخیص مولکولی سریع خطاهای ذاتی متابولیسمی می باشد که نشان می دهد این روش می تواند برای سایر بیماری های ژنتیکی به کار رود.

For inborn errors of metabolism, high resolution melting analysis (HRMA) is a rapid, efficient, simple, and inexpensive method for mutation/rare variant screening. HRMA is a recent molecular technique for genotyping single-nucleotide polymorphisms without using probes. Here we apply HRMA to the a-galactosidase a (GLA) and glucose-6-phosphatase-alpha (G6PC) genes for mutation detection of patients with Fabry disease (MIM 301500) and glycogen storage disease type 1A (GSD1A; MIM 232200), respectively. To evaluate the procedure, genomic DNAs were blindly tested for known GLA mutations (c.658C > T, c. 679C > T, c.772G > A, c.796G> A, or c.718-719delAA) in three affected males and two obligate heterozygotes with Fabry disease, a G6PC mutation (c.247C > T) in a patient homozygous for that lesion, and 10 healthy control Turkish individuals. HRMA clearly detected the mutant amplicons and discriminated them from all wild-type GLA or G6PC amplicons. HRMA proved to be a sensitive, specific, and cost-effective mutation screening method for the rapid molecular diagnosis of these inborn errors of metabolism, indicating that the technique can be readily adapted to other genetic diseases.