فایده ی مارکرهای مولکولی در تشخیص شیوع شغلی و تفریحی هیستوپلاسموزیس

قیمت: 45,000 تومان

دانلود رایگان مقاله

خرید ترجمه مقاله

عنوان فارسی

فایده ی مارکرهای مولکولی در تشخیص شیوع شغلی و تفریحی هیستوپلاسموزیس

عنوان لاتین

Usefulness of molecular markers in the diagnosis of occupational and recreational histoplasmosis outbreaks

هیستوپلاسموزیس مهم ترین میکوزیس سیستمیک در مکزیک در نظر گرفته می شود، و تشخیص آن نیاز به روش های سریع و معتبر دارد. مطالعه ی حاضر فایده ی PCR با استفاده از مارکرهای مولکولی Hcp100 و 1281-1283 (220) را در تشخیص Histoplasma capsulatum در شیوع شغلی و تفریحی ارزیابی کرد. هفت نمونه ی بالینی سرمی از افراد آلوده از سه شیوع مختلف هیستوپلاسموزیس با سنجش ایمونوسوربنت متصل به آنزیم (ELISA) برای تیتر آنتی بادی های ضد H. capsulatum و برای استخراج DNA پردازش شدند. چهارده نمونه ی محیطی نیز برای جداسازی H. capsulatum و استخراج DNA پردازش شدند. نمونه های DNA بالینی و محیطی با PCR با مارکرهای Hcp100 و 1281-1283 (220) آنالیز شدند. آنتی بادی های H. capsulatum در تمام نمونه های سرمی با استفاده از آنتی ژن های اختصاصی با ELISA آشکار شدند، و در شش مورد از این نمونه ها محصولات PCR هر دو مارکر مولکولی تکثیر شدند. چهار نمونه ی محیطی یکی از دو مارکر را تکثیر کردند، اما تنها یک نمونه هر دو مارکر را تکثیر کرد و یک جدایه از H. capsulatum از این نمونه کشت شد. همه ی محصولات PCR توالی یابی شدند، و توالی های هر مارکر با استفاده از ابزار جستجوی همترازی محلی پایه )BLASTn) آنالیز شد، که 98-95 و 100-98 درصد شباهت با توالی های مرجع سپرده شده در GenBank را به ترتیب برای Hcp100 و 1281-1283 (220) آشکار کرد. تایید شد که هر دو مارکر مولکولی در مطالعه ی شیوع هیستوپلاسموزیس در نمونه های بالینی یا محیطی مفید هستند.

Histoplasmosis is considered the most important systemic mycosis in Mexico, and its diagnosis requires fast and reliable methodologies. The present study evaluated the usefulness of PCR using Hcp100 and 1281–1283(220) molecular markers in detecting Histoplasma capsulatum in occupational and recreational outbreaks. Seven clinical serum samples of infected individuals from three different histoplasmosis outbreaks were processed by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) to titre anti-H. capsulatum antibodies and to extract DNA. Fourteen environmental samples were also processed for H. capsulatum isolation and DNA extraction. Both clinical and environmental DNA samples were analysed by PCR with Hcp100 and 1281–1283(220) markers. Antibodies to H. capsulatum were detected by ELISA in all serum samples using specific antigens, and in six of these samples, the PCR products of both molecular markers were amplified. Four environmental samples amplified one of the two markers, but only one sample amplified both markers and an isolate of H. capsulatum was cultured from this sample. All PCR products were sequenced, and the sequences for each marker were analysed using the Basic Local Alignment Search Tool (BLASTn), which revealed 95–98 and 98– 100 % similarities with the reference sequences deposited in the GenBank for Hcp100 and 1281–1283(220), respectively. Both molecular markers proved to be useful in studying histoplasmosis outbreaks because they are matched for pathogen detection in either clinical or environmental samples.