مطالعات جنبشی و اسپکترومتری جرمی روی پیشرَویِ آهسته ی پلیمریزاسیون کاتالیزی L-گلوتامیک‌اسید اسید دی‌اتیل‌استر با کاتالیزور پاپائین

قیمت: 38,000 تومان

دانلود رایگان مقاله

خرید ترجمه مقاله

عنوان فارسی

مطالعات جنبشی و اسپکترومتری جرمی روی پیشرَویِ آهسته ی پلیمریزاسیون کاتالیزی L-گلوتامیک‌اسید اسید دی‌اتیل‌استر با کاتالیزور پاپائین

عنوان لاتین

Mass spectrometric and kinetic studies on slow progression of papain-catalyzed polymerization of L-glutamic acid diethyl ester

پاپائین، L-گلوتامیک‌اسید دی‌اتیل‌استر (Glu-di-OEt) را به صورت جهت‌گزین پلیمریزه کرده و منجر به تشکیل پلی(γ-اتیل α-L-گلوتامیک‌اسید) می‌شود، با انواع درجات پلیمریزاسیونی که همگی کمتر از 13 هستند. دماهای کمتر از 20℃ برای این واکنش مناسب است چرا که مانع از تخریب غیرآنزیمی Glu-di-OEt شده و با ایجاد یک دوره القای آشکار، راندمان پپتید را افزایش می‌دهد. تحلیل اسپکترومتری جرمی واکنش در دمای 0℃ نشان داد که تجمع محصول اولیه‌ی دیمریزاسیون، یعنی L-گلوتامیل-L-گلوتامیک‌اسید تری‌اتیل‌استر (Glu-Glu-tri-OEt)، در دوره‌ی القا محدود می‌شود و پلیمر دنباله‌داری که از ازدیاد طول دیمر حاصل می‌گردد یک تترامر است و نه یک تریمر . تحلیل انرژی جنبشی برای واکنش‌های انتقال اسیل ، که در آن Glu-di-OEt و Glu-Glu-tri-OEt گروه های اسیل‌گیرنده هستند و αN-بنزوئیل-L-آرجینین‌اتیل‌استر اسیل‌دهنده است، نشان داد که Glu-Glu-tri-OEt، در مقایسه با Glu-di-OEt، پیوند مستحکم‌تری با هر دو زیرمجموعه‌ی S و S' در پاپائین برقرار می‌سازد. بنابراین آن‌چه در مرحله اول پلیمریزاسیون رخ داده است به این صورت قابل تفسیر خواهد بود: سرعت دیمریزاسیون Glu-di-OEt با کاتالیزور پاپائین، بسیارکم است درحالی که Glu-Glu-tri-OEt ابتدا سنتز می‌شود، منحصراً با مرکز فعال پاپائین پیوند برقرار می‌کند و سپس پاپائین، به جای مونومر از دیمر برای پلیمریزاسیون موثر بهره می‌برد.

Papain polymerizes L-glutamic acid diethyl ester (Glu-di-OEt) regioselectively, resulting in the formation of poly (γ-ethyl α-L-glutamic acid) with various degrees of polymerization of less than 13. Reaction temperatures below 20 °C were appropriate for the reaction in terms of suppression of non-enzymatic degradation of Glu-di- OEt and an increase in the peptide yield, while the reaction was preceded by a pronounced induction period. Mass spectrometric analyses of the reaction conducted at 0 °C revealed that the accumulation of the initial dimerization product, L-glutamyl-L-glutamic acid triethyl ester (Glu-Glu-tri-OEt), was limited during the induction period, and that a sequential polymer derived from a further elongation of the dimer was the tetramer, but not the trimer. Kinetic analyses of acyl transfer reactions with Glu-di-OEt and Glu-Glu-tri-OEt as acyl acceptors and Nα-benzoyl-L-arginine ethyl ester as an acyl donor affirmed that Glu-Glu-tri-OEt bound more strongly than Glu-di-OEt both to the S- and S′-subsites of papain. Therefore, what occurred during the initial stage of the polymerizationwas interpreted as follows: the rate of the papain-catalyzed dimerization of Glu-di-OEt was extremely slow, once Glu-Glu-tri-OEt was initially synthesized it exclusively bound to the active site of papain, and then papain utilized the dimer in polymerization effectively rather than the monomer.