توسعه ی روش کشت پلیت میکرولیتری برای غربالگیری سریع نژاد های تولید کننده ی ε-پلی- ال- لیسین

قیمت: 46,000 تومان

دانلود رایگان مقاله

خرید ترجمه مقاله

عنوان فارسی

توسعه ی روش کشت پلیت میکرولیتری برای غربالگیری سریع نژاد های تولید کننده ی ε-پلی- ال- لیسین

عنوان لاتین

Development of Microtiter Plate CultureMethod for Rapid Screening of ε-Poly-L-Lysine-Producing Strains

ε-پلی- ال- لیسین (ε-PL)، توسط Streptomyces albulus تولید شده و طیف وسیعی از فعالیت ضد میکروبی ارائه کرده و به عنوان ماده ی نگهدارنده غذا استفاده شه است. به منظور غربال کردن نژادی که باعث تولید بیش از ε-PL می شود، ارزیابی غربالگری تماما بالا و یکپارچه ای را با فناوری مهندسی ریبوزوم توسعه دادیم. پروتوکل تولیدی، تا پلیت های میکرولیتری با 24 و 48 حفره عمیق مقیاس بندی شد. ارزیابی میکروپلیت، برای نظارت بر تولیدد ε-PL استفاده شد. رابطه ی خوبی بین تخمیر MTP های 24 (48) و ارلن مایر مرسو مشاهده شد. با استفاده از این پروتوکل، تولید ε-PL در تمام MTP، کمتر از 5 دقیقه تعیین شد. نتایج نشان داد که تولید ε-PL با بازدهی بالا متغیر، تقریبا 45 درصد بیشتر از رنگ مادر می باشد. بنابراین انتظار می رود که توسعه ی این پروتوکل، بر انتخاب نژاد های ایجاد کننده ی ε-PL بیش از حد، شتاب گیرد.

ε-Poly-L-lysine (ε-PL) produced by Streptomyces albulus possesses a broad spectrum of antimicrobial activity and is widely used as a food preservative. To extensively screen ε-PL-overproducing strain, we developed an integrated high-throughput screening assay using ribosome engineering technology. The production protocol was scaled down to 24- and 48- deep-well microtiter plates (MTPs). The microplate reader assay was used to monitor ε-PL production. A good correlation was observed between the fermentation results obtained in both 24-(48)-deep-well MTPs and conventional Erlenmeyer flasks. Using this protocol, the production of ε-PL in an entire MTP was determined in <5 min without compromising on accuracy. The high-yielding strain selected through this protocol was also tested in Erlenmeyer flasks. The result showed that the ε-PL production of the high-yielding mutants was nearly 45% higher than that of the parent stain. Thus, development of this protocol is expected to accelerate the selection of ε-PL-overproducing strains.